TIMP2与宫颈鳞癌浸润转移有哪些联系？

宫颈鳞癌具有易浸润转移的特点，临床上研究其浸润转移的机制，想要通过切断其转移途径来从根本上解决宫颈鳞癌的浸润转移问题。c?Met癌基因产物是肝细胞生长因子(HGF)的受体，在许多恶性肿瘤的发生、发展、转移中起着重要作用[1]。但其在宫颈癌进展中表达的研究国内尚未见报道。基质金属蛋白酶( MMP)是一类很重要降解基质的蛋白水解酶，金属蛋白酶组织抑制物2（TIMP2）可特异性抑制MMP2活性，并可终止MMP家族所有成员的水解活性，还可抑制肿瘤血管形成，被认为是转移抑制基因之一，但其对宫颈癌侵袭转移的作用尚有争议。本研究应用免疫组化法检测正常宫颈上皮、宫颈上皮内瘤变（CIN）、宫颈鳞癌中c?Met蛋白和TIMP2的表达，进而探讨组织中c?Met、TIMP2与宫颈癌临床分期、淋巴结转移等的相互关系，希望能发现早期预测宫颈癌转移和预后的新指标，并为其治疗提供新的思路。
　　1 资料与方法
　　1.1 资料
　　收集2001～2005年间在莱芜市人民医院手术切除及活检的存档腊块标本，宫颈鳞癌40例，CIN 13例，同期正常宫颈组织15例。宫颈鳞癌病人年龄28～65岁，平均年龄49.6岁；临床分期采用国际妇产科联盟（FIGO）2000年修订的标准，Ⅰ期10例，Ⅱ期19例，Ⅲ期10例，Ⅳ期1例，其中21例伴有淋巴结转移，19例无淋巴结转移；宫颈鳞癌组织学细胞分级，Ⅰ级4例，Ⅱ级22例，Ⅲ级14例。CIN患者年龄23～58岁，平均年龄41.5岁。正常对照组的年龄31～68岁，平均年龄52.5岁。
　　1.2 试剂与方法
　　采用免疫组织化学SP法检测c?Met及TIMP2表达。鼠抗人TIMP2单克隆抗体，兔抗人c?Met多克隆抗体，通用型SP试剂盒，均购自北京中山生物工程有限公司。
　　1.3 结果判定
　　观察阳性反应采用双盲法。SP法阴性(-)：不着色；弱阳性(+)：细胞内出现淡棕黄色；强阳性(+++)：细胞内有棕黄色颗粒沉着；着色介于弱阳性和强阳性之间为中等阳性(++)。
　　1.4 统计学方法
　　免疫组化结果采用SPSS13. 0软件进行统计分析，不同组织间、病理分级、临床分期、淋巴结转移的比较采用秩和检验，采用Spearman等级相关分析。
　　2 结果
　　2.1 c?Met在不同宫颈组织中的表达
　　c?Met在正常宫颈上皮、CIN、宫颈鳞癌中表达水平依次显著升高，阳性比例分别为33.33%（5/15）、69.23%（9/13）、87.5%（35/40），（χ2 =22.29，P=0.000）。
　　2.2 TIMP2在不同宫颈组织中的表达
　　TIMP2在正常宫颈上皮中阳性比例为60%（9/15），但多为弱阳性；在CIN中阳性比例为76.92%（10/13），表达高于正常组织；到宫颈鳞癌又呈下降趋势，阳性比例为52.5%（21/40），但三者比较差别均无统计学意义(χ2 =4.65，P=0.098)。
2.3 c?Met与宫颈癌临床分期、转移和病理分级的关系
　　c?Met在临床分期为Ⅲ和Ⅳ期患者中表达高于Ⅰ和Ⅱ期的患者（Z=-2.21，Ｐ=0.041），有淋巴结转移者中表达高于无淋巴结转移者，（Z=-3.18，Ｐ=0.003），但不同病理分级间无差别（Z=-1.562，Ｐ=0.154）。c?Met表达与临床分期和淋巴结转移正相关，r分别为0.354和0.508，Ｐ分别为0.025和0.001；但与病理分级无关(r=0.25，Ｐ=0.119),见表1。
　　表1 c?Met在不同临床分期、病理分级和淋巴结转移中的表达
　　2.4 TIMP2与宫颈癌临床分期、转移和病理分级的关系
　　TIMP2在临床分期为Ⅲ和Ⅳ期患者中表达低于Ⅰ和Ⅱ期的患者（Z=-2.87，Ｐ=0.006），有淋巴结转移者中表达低于无淋巴结转移者（Z=-3.09，Ｐ=0.003），但不同病理分级间无差别（Z=-0.668，Ｐ=0.547）。TIMP2表达与临床分期和淋巴结转移负相关，r分别为-0.459和-0.494，P分别为0.003和0.001；但与病理分级无关(r=-0.107，Ｐ=0.511)，见表2。
　　表2 TIMP2在不同临床分期、病理分级和淋巴结转移中的表达
　　3 讨论
　　c?Met蛋白与HGF特异性结合后，受体自身酪氨酸磷酸化，进而可启动多条信号转导途径的级联激活，对多种组织器官的生长、发育、损伤修复以及细胞的分裂、分化、运动、分泌等发挥重要的调节作用。已有学者证实在妇科恶性肿瘤中存在HGF/c?Met系统过表达, 并发现随着肿瘤恶性进展，Met表达水平升高，且对HGF的诱导更易表现为侵袭性生长。本研究发现，c?Met在CIN中的表达强度较正常宫颈上皮升高，而在宫颈浸润癌中表达水平很高，说明c?Met的过度表达与宫颈癌的发生发展有关。研究发现HGF/c?Met系统可能通过影响细胞粘附因子、细胞外基质（extra celluar matrix,ECM）降解酶表达及增强瘤细胞侵袭力，诱导新生血管生成等参与肿瘤转移。本研究c?Met在临床分期晚、有淋巴结转移病人的癌组织中高表达，提示它在宫颈癌浸润转移中亦起一定作用。