鼻咽癌在我国较为常见,主要好发于我国的南方,尤以广东多见。由于鼻咽腔位置隐蔽、鼻咽癌症状无特异性与不突出,早期诊断比例较低,较大地影响了鼻咽癌患者生存的可能,而筛查是目前为止提高鼻咽癌患者早诊比例、降低其死亡人数的很好方法,所以对鼻咽癌筛查进行分析研究,非常必要。
鼻咽癌癌筛查分析研究
1、鼻咽癌筛查的意义
筛查是恶性肿瘤二级预防的主要手段,它主要通过某些检查手段,对无症状的高危人群进行定期监测,从而达到早期发现、早期治疗恶性肿瘤的目的。作为二级预防的疾病应具备以下条件:①严重危害人群健康以致生命;②早期诊断能提高其治治疗结果果;③有足够长的临床前期,并在期间有可被检测、有助于诊断的标记。
目前鼻咽癌病因仍未完全清楚,无确实可行的一级预防措施,因而对鼻咽癌的防治主要寄希望于二级预防,且其具备作为二级预防疾病的条件:①危害性较大。20世纪70年代鼻咽癌死亡人数居全国恶性肿瘤死因顺位第8位(中国标化比例1.88/10万),90年代仍居全国恶性肿瘤死因顺位第9位(中国标化比例1.19/10万);广东省中山市1970年-1999年30年间,鼻咽癌发病的可能总体水平有明显上升趋势,1970年其世界标化比例为14.02/10万,1999年上升为17.02/10万。②早期诊断确能提高其治治疗结果果。鼻咽癌治治疗结果果与病期关系密切,病期越晚,治疗越难,预后越差。许多临床和普查资料证明了这点。中山医科大学在"六五"、"七五"、"八五"、"九五"期间,对中山、四会、广州三地近10万人群进行的鼻咽癌早诊研究,也证明筛查能明显提高鼻咽癌早诊比例、5年生存的可能。③鼻咽癌有一定的临床前期。目前认为鼻咽癌是一个多因素、多阶段的发生、发展过程,这一过程包括启动、促进、恶性转变和进展阶段,需要经过一定的时间,而期间也有一定的方法可以检出其临床前期患者。此外由于鼻咽腔位置隐蔽,鼻咽癌早期症状、体征不明显与无特征性,容易漏诊、误诊,加上其自然病程进展较快,因而早期诊断比例较低。而因此对鼻咽癌进行筛查意义重大。
2、鼻咽癌诊断方法
目前可用于鼻咽癌的诊断方法主要有:头颈部物理检查:主要包括鼻咽、颈部淋巴结、颅神经检查,这是很基本的诊断方法。鼻咽脱落细胞学检查:鼻咽癌细胞涂片检出比例可达93.4%,可作为鼻咽癌普查、追踪手段,是鼻咽癌重要辅助诊断方法之一。鼻咽细针穿刺与活检:细针穿刺与涂片、活检阳性比例接近,是一种简便、易行、安全、经济、高效的肿瘤诊断方法。
有关EB病毒检查方法:包括EB病毒血清学检查、DNA酶特异性抗体检查、EB病毒基因及其表达产物检查等,该类检查只能作为鼻咽癌的辅助诊断,而不能作为其确诊手段。EB病毒血清学检查主要针对EBV感染人群后表达出的5种抗原(VCA、EA、EBNA、MA、LYDMA),主要包括以下几种检查方法:①VCA/IgA、VCA/IgG;②EA/IgA、EA/IgG;③CF抗体。EB病毒基因及其表达产物检查:目前可检出的主要有EBNA-1及其mRNA、LMP-1及其mRNA、LMP-2A及其mRNA、染色体畸变比例、染色体脆性部位和姐妹染色单体交换比例
检查:鼻咽癌患者及其一级亲属明显增高,可作为鼻咽癌及其高危人群的辅助检查。X线、CT、MR检查:目的在于确定有无颅底骨质侵犯,有无肺、骨等器官的远处转移,在于确定鼻咽腔有无肿块及其范围;指导临床分期与放射野设计。
鼻咽光纤镜检查:是目前鼻咽癌主要诊断方法之一,也可用于其它鼻咽疾病的诊断与治疗。
3、鼻咽癌筛查方法
鼻咽癌诊断方法众多,但不是所有诊断方法都可用以鼻咽癌的筛查。一般要求恶性肿瘤筛查方法具有以下几个条件:高敏感性与特异性;简便、快捷;经济,易为患者接受。
目前用于鼻咽癌筛查的方法主要有头颈部物理检查、EBV血清学检查、EB病毒DNA酶特异性抗体检查、EB病毒基因及其表达产物检查、染色体检查、鼻咽光纤镜检查等,其中头颈部物理检查、EBV血清学检查主要用于初筛,而染色体检查、EB病毒DNA酶特异性抗体检查、EB病毒基因及其表达产物检查、鼻咽光纤镜等主要用于初筛后的进一步检查。
头颈部物理检查方法的目的在于发现鼻咽癌及其癌前病变,宜在其它检查如EB病毒血清学检查筛选出可疑患者或高危人群之后进行,也可与EB病毒血清学检查等方法同步进行,如单独使用此方法,则投入的人力、物力较大,工作量较大。
EB病毒血清学检查是目前为止研究、应用得很多的鼻咽癌筛查方法,主要为VCA、EA抗体的检测,详述如下:EBV-VCA抗体检测:有IgA与IgG两种。其中IgG抗体普遍存在于各种人群的血清中,IgA则多见于鼻咽癌患者血清中,鼻咽癌筛查主要应用IgA抗体。其检测方法有免疫荧光法、间接免疫酶法、免疫放射自显影法三种,其中间接免疫酶法便可靠,免疫放射自显影法较前两者敏感性高,但其操作较繁杂,所需实验条件较多,不易推广。国内外许多学者将间接免疫酶VCA-IgA抗体检测技术应用到鼻咽癌临床诊断和大规模人群普查中,收到较好的早期发现、早期诊断鼻咽癌的效果。但VCA-IgA血清学检查只能作为一种鼻咽癌血清学辅助诊断方法,因为其有7%-10%的假阴性与较高的假阳性。
EBV-EA抗体的检测:和VCA抗体相比,EA抗体特异性很高,罕见于正常人,且随病情进展而滴度升高,但该抗体阳性比例较低(其IgG、IgA抗体阳性比例仅分别为75.67%、26.7%)。所以EA抗体常作为初筛后的进一步检查,或与VCA-抗体同时检测,以提高EB病毒血清学诊断水平。很初EA抗体的检测主要集中在其IgA抗体,其检测方法也主要为间接免疫荧光或间接免疫酶法,但近年来对EA/IgG检测以及EA抗体的ELISA检测方法日益重视,认为ELISA法检测EA/IgG的特异性与敏感性可分别达到97.7%、89.2%,与VCA/IgA免疫酶法合用可显著提高鼻咽癌筛查的有效性。
EBV-CF抗体检测:鼻咽癌、鼻咽粘膜病变、其它肿瘤患者、正常人群之间其抗体几何平均滴度存在显著差异,且随鼻咽癌患者病情进展而滴度升高。在正常人群其阳性比例为87.5%-94.2%,鼻咽癌患者阳性比例为100%(其主要差别在于不同疾病组其高滴度比例明显不同)。该检查方法简单易行,是大规模EB病毒血清流行病学调查的有效方法。EBV-DNA酶特异性抗体检测:是较敏感、特异的血清学诊断方法,有助于鼻咽癌的诊断、预后估计、治疗结果监测等。94%鼻咽癌患者血清中存在高滴度的抗EBV2DNA酶抗体(IgG抗体),且鼻咽癌、其它癌、正常人群三者之间EBV-DNA酶抗体水平有显著性差异。该抗体与VCA-IgA抗体滴度之间呈平行关系,可以补充VCA-IgA的不足,两种方法联合使用可降低鼻咽癌漏诊比例。
EBV-EBNA检测:抗补体免疫酶法检测鼻咽脱落细胞、细针穿刺物涂片、活检组织中EBV-EBNA,其阳性比例可达93.4%-100%,与组织学诊断相符比例达88%-92.6%。该法简单、特异性和敏感性高,有助于鼻咽癌的临床诊断与颈淋巴结转移癌、其它癌瘤、非癌瘤的鉴别诊断,与VCA-IgA检测合用可互补,与EBV-DNA一致性很强,或可取代EBV-DNA测定。近年来许多国内外学者对鼻咽癌患者EBNA血清学检测进行了分析研究,如Wei-minChen等认为单用ELISA法检测鼻咽癌患者血清EBNA12IgA的阳性比例、特异性分别为85%、86%,而EBNA12IgG的阳性比例与特异性分别为83%、86%。EBV-Zebra/IgG抗体检测:鼻咽癌组EBV-Zebra/IgG抗体阳性比例(ELISA法检测)为90.9%,明显高于其它各对照组(P均<0.01)。在鼻咽癌病理确诊前3.5年Zebra/IgG已表现阳性,且其水平随鼻咽癌病情变化而消长。自然人群、单阳人群、高危人群其阳性预测值分别为3.3%、3.8%和23.1%,可作为鼻咽癌的辅助诊断及其高危人群的筛查手段。Wei-minChen等认为单用ELISA法检测鼻咽癌患者ZEBRA/IgG的敏感度为79%,特异度为80%。
EB病毒基因、基因表达产物检测:利用EB病毒基因、基因表达产物去检测鼻咽癌及其高危人群,已取得不少成果,主要有:①EB病毒DNA:鼻咽癌活检组织中含有EB病毒DNA,从正常上皮→中度异型改变→重度异型改变→癌,EB病毒DNA阳性细胞数及其阳性程度越来越高,而EB病毒DNA并不存在于正常鼻咽组织、慢性炎症组织,因此,EB病毒DNA表达及其强度可作为鼻咽癌及其高危人群的筛查指标。②EB病毒潜伏基因EBERs:鼻咽癌全部表达阳性,癌前病变部分表达阳性,正常或单纯性增生/化生均阴性,因此鼻咽组织中EB病毒EBERs表达状况也可作为鼻咽癌及其高危人群筛查指标;③其它:所有或几乎所有鼻咽癌组织均表达LMP2AmRNA、EBNA1、BARFO转录物。
染色体检查:鼻咽癌被认为是遗传易感性肿瘤,鼻咽癌患者及其一级亲属外周血淋巴细胞染色体畸变比例、染色体脆性部位和姐妹染色单体交换比例明显增高,染色体携带有1p32,1p12,14q24,3p14,且其表达明显增高。利用上述检查可以筛选出鼻咽癌高危人群,但并非治疗筛查方法。
鼻咽光纤镜检查:经上述各种检查怀疑为鼻咽癌患者或高危人群,需要作进一步包括病理检查时,鼻咽光纤镜检查是必须的手段。它不仅能详细观察鼻咽表面的情况,更重要的是能钳取鼻咽组织,作进一步检查。其它:①鼻咽部血管分布研究:认为鼻咽部的异常血管增生可能是鼻咽上皮癌变转化过程的必须前提,有此改变者可视为鼻咽癌高危人群;②银染核仁组成区(AgNORs)及增殖细胞核抗原(PCNA)可作为鼻咽癌癌前病变指标。
4、鼻咽癌筛查方案
如上所述,可用于鼻咽癌筛查的方法众多,怎样将上述方法组合起来,才算好的筛查方案?曾毅很先在国内应用免疫酶法和免疫放射自显影法,检测EB病毒VCA/IgA、EA/IgA来普查鼻咽癌。随后各种方法与方案层出不穷,其中很有代表性的为黄腾波等提出的鼻咽癌筛查方案,该方案确定了鼻咽癌筛查地区、筛查对象、筛查指标及筛查程序,并经过长达10年近10万人的验证,认为确可筛选出鼻咽癌高危人群与早期鼻咽癌患者。肖锡宾等提出用ELISA检测血清EA/IgG加免疫酶法检测VCA/IgA筛查鼻咽癌,认为此方法比以上筛查方法特异性更高,而敏感性不低于单独使用VCA/IgA。Wei-minChen认为EBNA1/IgA、EBNA1/IgG和Zta/IgG三者合用,检测鼻咽癌的敏感性可达92%,特异性可达93%,超过了每种方法单独使用的效果,并认为这种联合方案尤其适用于正常人群筛查。该方案的特点在于将正常人群按照上述检查的结果,分为高危、中危、低危三组人群,低危人群患NPC风险低,约占93%健康人群,中危人群有中度患鼻咽癌风险,高危人群患鼻咽癌风险高,约占0.4%健康人群,此组人群为鼻咽癌高危人群,应进一步检查和追踪随访。但此方案尚未经过大样本的筛查证实,因而其效果如何尚拭目以待。
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